总 RNA 反转模块适用样本范围及具体要求有哪些？
浏览量：357 / 发布时间：2020-11-28
总 RNA 逆转录模块兼容多种类型样本，包括细胞、组织、FFPE 样本等。对于复杂样本的处理（如 FFPE 组织样本），推荐从源质控。样本应选取合适的提取试剂盒，并进行相应的定量及片段质检，建议如下：
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类别 |
要求 |
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提取试剂盒推荐 |
细胞系 RNA |
AllPrep DNA/RNA Mini Kit（Qiagen；货号，80204） |
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FFPE RNA |
AllPrep DNA/RNA FFPE Kit（Qiagen；货号，80234） |
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定量 |
基于分光光度计原理的 NanoDrop 和基于荧光染料的 Qubit®RNA HS Assay定量 |
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纯度 |
OD260/OD280=1.7~2.0。OD260/OD280 > 2.0 表明有异硫氰酸污染，< 1.7 表明有蛋白质等污染 |
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完整性 |
定量法 |
RNA IQ（By Qubit™ RNA IQ Assay Kit）＞4 RIN（ByAgilent 2100）＞3 DV200（By Agilent 2100；＞200 nt RNA所占比例）＞50 % |
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条带检测法 |
2% 的琼脂糖凝胶电泳或生物分析仪，如 Agilent 2100、Bioptic（Qsep）进行样本完整性评估。 |
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